电泳技术

  电泳技术是一种高技术、高要求、高装饰性的底层防腐处理工序。它是在外加电场的作用下,使分离于电泳液中的涂料微粒定向迁移并沉积于电极之一的工件表面形成保护性的涂层。目前电泳技术已被广泛应用于蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定。

发展历史

  早期的电泳技术是由瑞典Uppsala大学物理化学系Svedberg教授提出了荷电的胶体颗粒在电场中移动的现象称其为电泳(electrophoresis)。

  于1937年,收Arne Tiselius教授---诺贝尔奖金获得者,利用些电泳现象,发明了最早期的界面电泳(moving boundary),用于蛋白质分离的研究,开创了电泳技术的新纪元。此后,各种电泳技术及仪器相继问世,先进的电泳仪和电泳技术的不断发展,使它在生物化学实验技术中占重要地位。

种类

  电泳技术以支持物分,可分为:纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳,琼脂(糖)凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳等。经凝胶形状分有水平平板电泳,园盘柱状电泳及垂直平板电泳。各种类型的电泳技术概括如下:

  须用支持体的电泳技术:1、纸上电泳术,2、醋酸纤维薄膜电泳,3、薄层电泳,4、非凝胶性支持体区带电泳(支持体有:淀粉、纤维素粉、玻璃粉、硅胶等),5、凝膝支持体区带电泳:①淀粉液、②、聚丙烯酰胺凝膝③、琼脂(糖)凝胶。

  不用支持体的电泳:1、Tiseliuse或微量电泳技术,2、显微电泳,3、等电点聚焦电泳技术,4、等速电泳技术,5、密度梯度电泳。

原理

  在电场中,推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。F=QE质点的前移同样要受到阻力(F)的影响,对于一个球形质点,服从Stoke定律,即:F′=6πrην式中r为质点半径,η为介质粘度,ν为质点移动速度。当质点在电场中作稳定运动时:F=F′即QE=6πrην。

  从上式可见,球形质点的迁移率,首先取决于自身状态,即与所带电量成正比,与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外,电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。

作用

  1、 正确解释电泳结果,有助于临床疾病判断的参考

  2、 电泳技术与免疫技术相结合,大大扩大了其临床应用的范围

  3、 电泳技术进行同工酶谱分析,提高诊断率

  4、 结合酶免疫标记抗体技术,检测脑脊液内寡克隆区带

  5、 利用固相内抗原、抗体反应分离脂蛋白

  6、 按分子量大小进行非浓缩尿蛋白电泳,区分尿蛋白类型

应用

  各类电泳技术已经广泛地用于基础理论研究,临床诊断及工业制造等方面。例如用醋酸纤维薄膜电泳分析血清蛋白;用琼脂对流免疫电泳分析病人血清,为早期诊断原发性肝癌提供资料;用高压电泳分离肽段,研究蛋白质一级结构;用高压电泳和层析结合研究核酸的一级结构。凝胶龟泳技术在分离分析酶。蛋白质,核酸等生物大分子方面具有较高的分辩力,为生物化学,分子生物学的发展作出了重大贡献。

 

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