紫外可见分光光度计

种类

　　分光光度计从分光元件来讲可分为棱镜式和光栅式两种，也有光栅加棱镜的分光光度计，现今的分光光度计大部分采用光栅分光。从结构上来区分可分为单光束、准双光束、双光束和双波长分光光度计

　　（1）棱镜式分光光度计

　　棱镜式分光光度计采用棱镜作为分光元件，是分光光度计诞生前后分光的主要元件，随着电气化的发展，棱镜分光给结构设计带来了很大的麻烦，应用起来不够灵活，所以逐渐的被淘汰了，但在相当长的一段时间内，国内外的主要厂商都采用棱镜，到目前为止还有部分国内厂商在721、751等分光光度计上采用棱镜作为分光元器件。我们后边讨论的都是光栅式分光光度计，棱镜式后面不作分析。

　　（2）单光束分光光度计

　　1945年美国Beckman公司推出的台成熟的分光光度计，就是单光束分光光度计。单光束分光光度计只有一束单色光、一只比色皿、一只光电转换器。这种分光光度计测试过程简便，有高、中、低档之分。低档的目前国内有两种：一种是手动设置波长，通过旋钮转动刻度盘，同时带动光栅，从而达到设置波长的目的；一种是自动设置波长，通过电机带动扇形齿轮，同时带动光栅，从而达到自动设置波长的目的。这两种单光束分光光度计，之所以说它们低档，主要是因为它们的技术指标相对较差，他们的主要技术指标像：波长准确度一般在±2nm，波长重复性一般在1nm，功能也相对简单，测试结果误差较大。例如目前国内用的较多的型号有：721（上分）、722（上分）、751（上分）、752（上分）、754（上分）、T6（北京普析）。中档的目前国内一般采用丝杆结构，采用自动波长设置，电路设计也比较合理，采用较好的屏蔽技术和滤波技术，成品仪器比较稳定，也不易受外界的干扰，但是这种仪器，每个厂家做出来的效果不尽相同，有的做出来很不稳定，有的却很可靠，因为每个厂家的技术存在很大的差异，特别是在关键点上的处理，例如190nm处的稳定性，国内目前很少有厂家做的好，有的厂家甚至在200nm处还很不稳定，220nm处的杂散光，国内厂家目前一般在0.2[%]T，很少有厂家能做到0.1[%]T以下，这种档次的仪器的波长准确度一般能做到±0.5nm，波长重复性一般能做到小于0.3nm。这种档次的仪器目前的性价比比较好，销量也很不错。像国内现在比较流行的型号如：756。的单光束分光光度计，一般采用非常先进的微机处理技术，电路设计也是非常的出色，结构设计也是极为合理，光路准确可靠，此类单光束分光光度计基本可以和准双光束以及双光束媲美，主机功能丰富，界面清晰，读数直观。

　　单光束紫外可见分光光度计的基本结构

　　（1）准双光束紫外可见分光光度计

　　所谓准双光束，就是有两束光，一束通过比色皿，另一束光直接进入光电转换器。严格意义上来讲准双光束属于单光束。国内出现准双光束分光光度计主要是因为国内部分分光光度计厂家的电路设计和结构设计有缺陷，试图通过用一束光进入光电转换器来作抵消，从而保证仪器的稳定性，但在通常情况下和单光束没有什么区别，对测试结果来说也是如此。准双束有两种：一种是两束单色光，一束单光束经过比色皿进入光电转换器，一束光直接进入光电转换器；另一种是一束单色光和一束复合光，一束单色光经过比色皿进入光电转换器，一束复合光直接进入光电转换器。后一种因为存在一束复合光，通常情况下不但不能起到抵消的作用，反而会给测试结果带来不确定因素，所以不常用。前一种现在用的相对较多。

　　两束单色光准双光束紫外可见分光光度计的基本结构

　　（1）双光束紫外可见分光光度计

　　双光束紫外可见分光光度计就是有两束单色光，并且两束光都经过比色皿的紫外可见分光光度计，此类分光光度计的光源波动、杂散光、电噪声的影响都能部分抵消，但同时因为一束光被分成两束光，能量变低，产生了光的波动、杂散光、电噪声。主要应用在待测溶液和参比溶液随时间的变化浓度也随之变化的实验中，起到随时跟踪，抵消应浓度的变化而给测试结果带来的影响。关于单光束和双光束的优劣，目前还是众说纷纭，各有优缺点，实际应用过程中应该根据自己的需要选择合适的分光光度计。双光束分光光度计也有两种：一种是一只光电转换器，另一种是两只光电转换器。

　　双光束紫外可见分光光度计的基本结构

　　（1）双波长紫外可见分光光度计

　　双波长紫外可见分光光度计都采用两个单色器，光源发出的光被两个单色器分别分离出波长为λ1和λ2，用斩波器将两束单色光λ1和λ2交替入射到同一试样中，接受器交替地接受经过试样吸收后的这两束单色光，并把它们变成电信号，电信号经过处理后转化为它们之间的吸光度差ΔA，通过下列公式可计算出试样中待测物质的浓度。

　　ΔA=Aλ2- Aλ1=（ελ2-ελ1）bc

　　ΔA为物质在λ2波长下吸光度和物质在λ1波长下吸光度的差值

　　Aλ2为物质在λ2波长下吸光度

　　Aλ1为物质在λ1波长下吸光度

　　ελ1为待测物质在波长λ1的摩尔吸光系数

　　ελ2为待测物质在波长λ2的摩尔吸光系数

　　b为光程

　　C为待测物质的浓度

　　双波长紫外可见分光光度计的基本结构

　　双波长紫外可见分光光度计主要适用于试样的多组分测量，目前国内市场很少采用此类分光光度计。

特点

　　●高精度光栅分光，波长自动调节

　　●分析2～8只样品，自动建立回归工作曲线

　　●体积小，重量轻

　　●配RS232串行口和计算机或打印机相连可实现数据传输或打印输出

技术指标

应用

　　紫外可见分光光度计是一种历史悠久、覆盖面很广、使用很多的分析仪器，在有机化学、生物化学、药品分析、食品检验、医药卫生、环境保护、生命科学等各个领域的科研、生产工作中都得到了极其广泛的应用。