薄层色谱(TLC)是色谱技术的一种:将固定相涂布于玻璃板上或铝板上，成一均匀薄层，样品中各组分随流动相在薄层中定向移动，不同组分和固定性/流动相的作用力不同而实现了分离。
薄层色谱，分离后的物质通过直接观察，或者染色处理后观察，或者在紫外灯照射下观察。其中紫外照射荧光观察是常用的方法。
但是薄层色谱法具有操作简单、快速，设备投资小、检测运行成本低等特点，在各领域得到广泛应用。
1.测量方式：反射吸收、反射荧光；透射吸收、透射荧光
2.波长范围：190-800nm；扫描速度：Max100mm/s
3.光源：氘灯、卤钨灯、高压汞灯（标准配置，自动转换）
4.波长准确度：优于1nm；波长重现性：优于0.2nm
5.软件：winCATS（Windows 2000/NT,32位操作系统）
1.波长范围宽、扫描速度快；
2.自动化程度高、操作简便；
3.单色器性能好；
4.软件功能强大；
5.技术。
薄层色谱扫描仪是对薄层色谱进行定量检测分析的仪器，目前市场上有两类薄层色谱扫描仪：
传统薄层色谱扫描仪
是一种全波长扫描仪，提供波长200-800nm范围的可选波长，通过检测样品对光的吸收强弱确定物质含量。该扫描仪也能检测254nm或365nm紫外照射产生的荧光强度，从而进行特异性检测。
传统扫描仪的扫描方式分为：单光束扫描、双光束扫描和双波长扫描。
单光束扫描：采用单一光束（即单一波长扫描），其结果就是上图中一特定波长条件下的单条曲线。仪器结构简单，但是基线不稳，实际中很少使用。
双光束扫描：采用同一波长的两个光束同步扫描，一个光束扫描样品展开通道，另一个光束扫描样品通道旁边的区域，这样就可扣除吸收，部分消除薄层板展开方向铺板不均匀产生的误差。但是无法消除垂至于展开方向铺板不均匀产生的误差。
双波长扫描：两个不同波长的光束交替扫描样品展开的通道区域，波长选择时，一个波长为样品大吸收位置，另一是吸收极小值位置。如上图所示，如检测目标为3（则大吸收峰为290nm，极小值可选200nm、260nm或325nm）。这种方法可基本消除铺板不均产生的误差，因此扫描基线很稳定。 ?
以上各种扫描方式中，根据光源大小（扫描精度）不同可分为直线扫描和锯齿扫描。
直线扫描：用可以覆盖样品展开通道的宽光束一次性扫完整个展开通道，即在展开方向上（图中横坐标），每个点的数据只是一个扫描数据点。
锯齿扫描：采用点状光源，光点尺寸小于通道宽度，因此在展开方向移动到任何一点时，光源都要逐点沿样品通道方向扫描，即形成“之”形（或锯齿形扫描）。这样，在展开方向上每一点的数据都是多个点扫描结果的累加值。锯齿扫描的精度相对直线扫描明显提高。
目前，在定量分析中，薄层扫描多采用双波长锯齿扫描。
薄层分析的误差包括三个方面：点样误差、展开误差、定位误差和检测误差。
采用自动点样器，误差可控制在0.5%，熟练的分析人员用毛细管点样，误差小于1.0%，若用微量进样器，误差会大一些。
展开误差来自铺板的均匀性和样品展开效果，若采用预制的高效薄层板，误差会明显降低，采用双波长锯齿扫描，也能有效降低展开误差。
定位误差值斑点的位置和大小判定，扩散、脱尾等易产生定位误差。检测误差来自光源的稳定性、光检测器的稳定性以及样品对光吸收（或荧光产生）的线性度等方面。为减少这些误差，需要非常精密的机电系统，这也直接导致产品高昂的价格。
通常情况下，薄层扫描分析的误差在3%以下。
薄层数码成像分析仪
薄层数码成像分析技术是利用数码成像设备获得薄层板上各点的光强度信息，之后对获得图像进行分析的薄层分析技术。数码成像设备包括两种：照相机和扫描仪（由于数码扫描仪采用逐行成像技术，为便于区分传统薄层扫描仪的逐点扫描，将数码扫描仪称为逐行扫描仪）。
和传统薄层扫描一样，照相机或逐行扫描仪都具有光检测系统，它们都是将光量线性转化为电信号的元件。不同的是，照相机和逐行扫描仪可进一步将电信号转换成电脑图像，图像中单个点（像素）的颜色深浅反映了光的强弱。
因此，薄层数码成像更接近人眼观察检测，结果更直观，因此非常适合鉴别，特别是中药指纹图谱的识别。
数码成像仪不仅能完成普通白光照射下的成像分析，再装配254nm或365nm紫外灯后，也可以检测特异荧光，特异荧光检测。
根据数码成像原理，薄层数码成像从技术上可理解为单光源密集扫描。和传统薄层扫描系统相?比，由于使用单一光源，效果不如双波长扫描（即无法消除铺板不均产生的影响）；而在扫描精度方面，却要锯齿扫描。
在光源稳定均匀性控制方面，照相机采用一次性闪光，不存在稳定性问题，但是照相机用点光源发散形成面光源照射到薄层板上，均匀性较难保证；逐行扫描仪采用线性光源，光源稳定均匀性较传统薄层扫描的光束要好。
数码成像分析以图像显示，对斑点正确选择可消除定位误差。因此在采用预制高效薄层板分析时，数码成像分析可获得与传统薄层扫描仪同等的定量精度和准确度。
在操作时间方面，照相机成像快，逐行扫描仪需数秒或者几十秒，而传统薄层扫描仪通常要几分钟。
数码成像分析的不足在于只能使用白光、254nm、365nm和312nm等特定光源，而数码成像的显著优势是价格，比传统薄层扫描仪低得多。
CAMAG TLC SCANNER 3 薄层色谱扫描仪是卡玛公司四十余年研制薄层色谱仪器的智慧结晶，它有波长范围宽、扫描速度快、自动化程度高及操作简便等特点，是目前世界上的薄层色谱扫描仪。
·扫描速度快（快100mm/s），强大的数据采集（达9600DPS）及数据传输（115200baud/s），配合高精度测 量平台（重现性X轴优于100um，Y轴优于50um），保证扫描的准确度与重现性。采用20mm/s扫描速度对 每条轨道长80mm，有18条轨道的薄层板进行扫描，只需不到5分钟就可完成包括计算和生成报告在内的所有工作。
·多一次能计算36条轨道，每条轨道多可检测100种组分。
·积分可采用自动或手动基线校正，自动或手动峰编辑。
·图形外观可方便地将物质名称与峰对应。
·可对薄层板上所有检测到的峰进行自动光谱扫描。
·灵活设置的报告可打印包含从带有物质名称的2维模拟曲线到复杂的3维图在内的彩色图像。
·数据文件还包括固定相、色谱图数据和图像等所有信息。
·定量计算支持以下校正功能：单水平校正，使用内标或外标的线性校正，非线性回归的多水平校正，相对 标准 偏差（cv）统计等。
·副成分计算（包含在定量计算内）可用来按照欧洲或美国药典规定，通过和主成分比较来定量未知峰。
·双波长扫描：色谱由两个选定的不同波长进行扫描，积分时测量波长扫描的信号减去参比波长扫描的信号，用 来扣除背景干扰。双波长扫描还可用于对未完全分离的峰进行定量。
·多波长扫描：色谱多可用31种不同波长扫描，允许多重计算，以达到优化选择，定量计算时对每一片断分 别选用佳波长的数据。winCATS的这一功能是薄层色谱中的。
·仪器校验：可对扫描仪的机械、光路及电子功能进行自动监控，并能进行自动调整，纠正偏差。校验功能还可 应用于自动点样、自动展开仪等所有可由winCATS控制的仪器。
·轨道优化：可对每一色谱轨道进行多次扫描，每次扫描位置略微侧移，自动计算轨道的高峰并用于定量，可 对歪曲的色谱进行正确计算。
·光谱扫描：可对所有轨道、所有斑点进行全光谱扫描，自动确认光谱位置，并组分鉴别及纯度鉴定功能。光谱记录范围可自由地在190nm到800nm选择； 灯从D2到W灯自动转换， 光谱记录速度达100nm/s，光谱采集40次/nm，确保光谱扫描快速准确。
·光谱库：卡玛可提供常见药物的光谱库，与用户自己建立的薄层色谱光谱库结合，对不同薄层板上的光谱记录 进行比较。
·符合美国FDA 21 CFR part 11有关电子记录和电子签名等的规范，具有工作日志，记录所有操作信息、仪器
运行状况（包括点样、展开、扫描、成像等步骤中所有可用winCATS控制的仪器）、数据变动等。
1 薄层板制备：除另有规定外，将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2—0.3mm），取下涂好薄层的玻璃板，置水平台上于室温下晾干，后在110℃烘30分钟。即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度（可通过透射光和反射光检视）。
2 点样：除另有规定外，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边2.0cm，点样直径为2——4mm，点间距离约为1.5—2.0cm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。
3 展开：展开室如需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖，使系统平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5—1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中），密封室盖，等展开至规定距离（一般为10—15cm），取出薄层板，晾干，按各品种项下的规定检测。
如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出，或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量，则可用薄层扫描法。薄层扫描的方法，除另有规定外，可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明，结合具体情况，选择吸收法或荧光法，用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果的因素很多，故应在保证供试品的斑点在一定浓度范围内呈线性的情况下，将供试品与对照品在同一块薄层上展开后扫描，进行比较并计算定量，以减少误差。各种供试品，只有得到分离度和重现性好的薄层色谱，才能获得满意的结果。
1 所用玻璃板应洗净不挂水珠，光滑平整。
2 铺板要均匀，厚度适宜，并于室温下晾干后在110℃活化30分钟，置于 有干燥剂的干燥箱或干燥器中备用。
3 点样点一般为圆点，不能太大。
