*红检测试剂盒

1. 概述：*红ELISA检测方法适于食品种的定量或定性检测，可检测番茄汁、番茄酱、辣酱汁、辣椒酱，辣椒粉，萃取和稀释程序请参看技术公告。检测结果需要HPLC，GC/MS或其他方法确证。www.winstrument.cn 2. *说明试剂盒中的标准溶液含有少量的*红。此外，底物溶液中含有四甲基邻苯二胺，终止液中含有盐酸。应避免皮肤和粘膜接触终止液。如果此类试剂接触到皮肤，应用水冲洗。 3.保存和稳定性*红ELISA试剂盒需冷藏（4-8℃）。*试剂在使用前应该平衡到室温（20-25℃）。试剂可以使用至*期。 4. 检测原理本试剂盒基于*体识别*红的原理。*红HRP标记物与标样及样品提取液中的*红竞争与溶液中的兔**红*体结合。*红*体与包被板上的二*结合。经洗涤步骤后加入底物，显色（蓝色）。经20min孵育，反应被终止，颜色变为黄色，读取各孔OD值。比较未知样品的颜色和标样的颜色，就可得出样品中的*红浓度。用每个标准样品点绘制出标准曲线，样品浓度在标准曲线内查出。 5.本试剂盒的局限和可能产生的干扰经测试食品样品如番茄汁、番茄酱、辣酱汁、辣椒酱，辣椒粉，经稀释缓冲液稀释起到很好的去除基质反应的效果，大多数样品中的*和无机物经测试对本反应没有影响。然而，由于样品成份的多样性，不能*避免矩阵反应的干扰。一些其他的食品有可能需要不同的稀释，并需要确认*性。误错误的操作可能导致错误，如：试剂盒缺乏*要的储存条件，错误的加液顺序或加液量，底物孵育时间过长或过短，在测试过程中反应温度*出范围（低于10℃或高于30℃）。*红ELISA试剂盒提供了初筛的结果，同其他方法（GC，HPLC等）一样，结果需经其他方法确证。 A提供的试剂及材料 1． 用铝箔袋真*装的96孔板(Microtiter plate) （12×8条），包被二*（*兔），内含指示干燥剂。 2． 浓度分别为 0，0.25，0.50，1.0，3.5，5.0ng/ml(ppb) 的6瓶*红标准液(Calibrator/Standard)。 3． 1 瓶6mL *红HRP酶标记物. （Sudan Red-HRP Conjugate） 4． *红*体溶液 （Anti- Sudan Red Antibody solution）6ml 5． 1 瓶 12 mL 底物(Substrate). 6． 1 瓶 6 mL 终止液(STOP SOLUTION). (小心操作) 7． 5×浓缩洗液Wash Solution，用去离子水或蒸馏水稀释5倍。 8． 样品稀释液Sample Diluent 30ml B试验准备微量加样器和加样头对于移取样品和标准品是*须的，推荐使用多道移液器加酶结合物。加入底物和终止液的顺序要一致。在一次试验中使用一个批次的试剂，在装配试剂时可能会有相应的调整。 1. 将*试剂及样品置于室温。 2. 从铝箔袋中取出相应数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子，放入冰箱（4-8℃）。 3. 标准品、酶结合物、*体、底物和终止液无需稀释，直接使用。 4. 洗液以1:5稀释。如果使用整瓶（100ml），使用400ml去离子水或蒸馏水稀释。 5. 操作终止液要小心，因为内含*溶液。 C检测步骤 1. 按加样单顺序，吸取50ul标样或稀释的样品提取液到相应的微孔。推荐双孔或三孔测试。 2. 使用单道或多道移液器，每孔加50ul*红HRP酶标记物。 3. 使用单道或多道移液器，每孔加50ul*红*体溶液。 4. 用封口膜封板，扶着板架上方作圆周运动，轻轻混合30秒（避免溅出液体），孵育45分钟。 5. 用洗液洗板四次，每次每孔加入250洗液，将孔中的液体在吸水纸上拍干。 6. 每孔加入100ul底物溶液，避光孵育20分钟。 7. 每孔按加底物的顺序加入50ul终止液。 8. 加入终止液后 9. 15min内，用酶标仪读取450nm下的吸光值。 D 结果评估www.5117dxy.com 本试剂盒用商品化ELISA评估软件(4个参数或Lo*/Log)进行评估。进行手动评估时，先计算出每个标样的平均OD值。用每个标样的平均OD值除以0标样的平均OD值，得到每个标样的％B/B0值。以每个标样的％B/B0为纵坐标，相应的*红浓度对数为横坐标构建标准曲线。根据样品的％B/Bo，就可用标准曲线计算出样品中*红的浓度。*红浓度小于标样1 (0.25ng/mL或ppb)的样品报告<20ppb。浓度高于标样5(5 ng/mL)的样品*须进一步稀释以获得更准确的结果。半定量的结果可以通过比较样品和标样的OD值得到，样品颜色比标样颜色浅说明样品中的*红含量高于标准品浓度，样品颜色比标样颜色深说明样品中的*红含量低于标准品浓度。 E. 未提供的材料 1. 微量移液器和一次性塑料吸头(50-200) 2. 多道移液器或连续移液器及吸头(50-250 ul) 3. 洗板机(可选择) 4. 酶标仪(波长450 nm) 5. 微量振荡器(可选择) 6.蒸馏水或去离子水 7.甲醇 8.吸水毛巾或其它吸水材料 9.计时器 F工作表微孔板包括12个8孔条，可以分别使用。每次检测均要测试*的标准样品，不可以使用以前测试过的标准样品值。 注：图片及文字介绍仅供参考，请以实物为准