大肠杆菌测试片原理及适用范围
肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种新出现的食物传播性*的病因。它除引起*、出血性肠*外,还可发生溶血性尿毒*、血栓性血小板减少*等严重的并发症。自1982年美国*次发现因该致病菌引起的食物中毒以来,肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延,相继在英国、加拿大、日本等多个*引起**和流行。我国已陆续有十余个省份在市售食品、*食品、*病*、家畜家禽等分离到大肠杆菌O157:H7。大肠杆菌O157测试片(BO204)运用微生物测试片专有技术,做成一次性快速检验产品,一步培养15~24h就可确认,大大地简化了检测程序,**级检验部门和食品企业使用。
操作方法
样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL*生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液。
接种:将大肠杆菌O157测试片(BO204)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用*吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5min使培养基凝固,*后用手轻轻地压一下,每个样品接种两片。
培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝*平置于恒温培养箱内,堆叠片数不*过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
结果判读
对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为大肠杆菌O157:H7;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本,*好用其他更为*的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验一次。
附加说明
1、本品所用培养基已在国外得到比较广泛的应用,有关验证试验表明,接纯菌种可以产生典型的紫红色菌斑,灵敏度*98%(K.A.Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。
2、本公司检测大肠杆菌O157测试片对纯菌的检测灵敏度为0.5cfu/mL,3次试验结果测试片与平皿法的*合率平均*96.3%。
3、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物*废弃物处理原则进行处理 。